[생명과학] RT-PCR(역전사효소 PCR)

코로나19 관련해서 RT-PCR이라는 용어를 많이 들어봤을 것입니다.

코로나19 같은 RNA를 유전체로 가지는 바이러스들을 검출할 때 RT-PCR 기술이 필수적이기 때문입니다.

 

RT-PCR ; Reverse Transcriptase - Polymerase Chain Reaction

(역전사효소 - 중합효소 연쇄 반응)

 

유전자의 RNA 발현 정도를 측정하는데 이용합니다.

cDNA(complementary DNA, 상보적 DNA)를 주형으로 이용하여 PCR을 수행합니다.

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PCR 과 RT-PCR의 차이점은?

PCR은 세포나 조직의 DNA를 단순히 증폭하는 것이지만

RT-PCR은 원하는 유전자의 전사체인 RNA에서 cDNA를 만든 후 클로닝 하는데 사용합니다.

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과정

RT-PCR의 방법. 이 경우에는 RT-PCR의 주형으로 mRNA를 사용하였다. (출처: 위키피디아, https://en.wikipedia.org/w/index.php?curid=37925789)

 

1. 원하는 RNA를 역전사 효소(reverse transcriptase)를 이용하여 cDNA를 합성합니다.

 

2. cDNA를 주형으로 PCR을 수행하면 이중가닥의 DNA가 됩니다.

 

3. 이중가닥의 DNA를 주형으로 PCR을 수행하여 증폭(amplification)시킵니다.

 

결과

세포나 조직에 극소량으로 존재하여 예전의 노던블랏으로 찾아낼 수 없는 mRNA를 검출할 수 있다.

RNA를 유전체로 가진 바이러스의 RNA를 검출할 떄는 RT-PCR이 필수적이다.

 

참고 : https://terms.naver.com/entry.nhn?cid=61233&docId=5569262&categoryId=61233

역전사효소 PCR